胆汁酸定量分析
胆汁酸的介绍
胆汁酸（bile acids，BA）为胆汁的主要有机成分，是几种来源于肝细胞胆固醇代谢的甾体C24羧酸的统称，在脂肪代谢中起着重要作用。 胆汁酸主要存在于肠肝循环系统并通过再循环起一定的保护作用。BA的合成涉及两种主要途径(即经典的中性途径和替代的酸性途径)，多个步骤和至少16种酶。BA合成生成初级胆酸(cholic acid，CA)和鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid，CDCA)。在肝细胞内，BAs会与牛磺酸或甘氨酸结合，并通过羟基化、硫酸化和葡萄糖醛酸化代谢。胆汁酸及其结合物从肝细胞分泌到小管空间，并储存在胆囊中。进食后，胆汁和BAs被释放到小肠内帮助消化。在肠道中，CA和CDCA被肠道细菌去羟化，形成亲脂性二次脱氧胆酸(deoxycholic acid，DCA)和石胆酸(lithocholic acid，LCA)。这些化合物大部分在回肠末端被重吸收，并通过肠肝循环返回到肝脏。未参与肠肝循环的BAs则进入结肠进行进一步的细菌代谢，如去毒、氧化还原、对吡肟化、7-去羟基化和酯化，然后以粪便的形式排出。迄今为止，已在人类、啮齿动物和其他动物中发现并确认了几十种胆汁酸。
定量胆汁酸全谱分析平台
华怡创生靶向代谢组学平台具备先进的检测仪器及稳定的多反应监测定量方法，具有丰富的胆汁酸标准品种类和胆汁酸定量经验，能够绝对定量检测50种胆汁酸。利用超高效液相色谱-三重四级杆质谱（UPLC-TQMS），可进行复杂样品中胆汁酸的分离和谱峰面积采集，利用胆汁酸全谱标准品构建标准曲线，计算每种胆汁酸在样品中的绝对浓度，利用国际标准NIST血清精确校准批次样品间的准确性。在确保50种胆汁酸精确定性的同时，所获得的胆汁酸绝对浓度值也可以与文献中相关研究的胆汁酸数据进行横向比较。
送样要求
华怡创生可检测胆汁、血浆/血清、尿液、组织及粪便/肠溶物样本中的胆汁酸浓度。对于胆汁、血浆/血清、尿液液体样品，需要至少100微升的样品量，而对于组织及粪便/肠溶物则需要至少50毫克的样本量。需要注意的是，血浆样本送检前需要加入EDTA抗凝。
典型案例—基于磷脂-耗竭固相萃取方法对人和小鼠血液中胆汁酸进行代谢分析
为了获得胆汁酸(BAs)在血液中的全面概况，开发了超高高效液相色谱/多反应监测-质谱(UPLC/MRM-MS)方法分离和检测了50个已知的BAs。该方法采用磷脂-消耗固相萃取法作为一种新的高效样品制备方法，并采用负离子电喷雾离子化的UPLC/定时MRM-MS分别对7个禁食和未禁食个体的血清样本、6只淤胆基因敲除小鼠和6只年龄和性别匹配的野生型(FVB/NJ)小鼠的血浆样本中的胆汁酸进行了靶向定量。该方法定量精度较好，并能定量测定血液中最大数量的BAs。
