尿液非靶向代谢组学
尿液非靶向代谢组学背景介绍
尿,又称尿液,是人类和脊椎动物为了新陈代谢的生理需要,经由泌尿系统及尿路排出体外的液体排泄物。排出的尿液可调节机体内水和电解质的平衡以及清除代谢废物且可同时散热,尤其是退化变性的蛋白质和核苷酸所产生的含氮化合物。正常成年人日均排尿量约为1500~2500mL。pH值约为6.5。
尿液是一种关键的生物基质,其收集比较容易,虽然它依赖于动物和收集时间,但尿液样本几乎对体积没有限制。尿液中的化合物比其它基质更多,使得尿液代谢组的数据分析和生物学解释更具有挑战性。
华怡创生可通过液质联用(LC–MS/MS)方法检测生物体尿液中大量代谢分子的动态变化,从中找出表达差异的代谢分子,进而揭示生物体尿液代谢相关过程中代谢分子机制,服务于科研及临床诊断相关疾病。
实验步骤:
(1)QC样本混合,确保实验条件稳定、实验结果可靠;
(2)代谢物提取,优化提取溶剂体系及提取方法;
(3)液质参数优化,包括流动相比例及洗脱梯度、柱温、流速,离子源种类及温度、扫描模式、扫描范围、二级采集模式等;
(4)代谢物鉴定,使用保留时间、准分子离子峰及二级质谱信息对比化合物标准品和多种数据库,确保高质量的化合物鉴定;
(5)统计学分析,包括单变量统计分析(t检验,倍数变化分析,火山图分析)及多元统计分析(PCA主成分分析,PLS-DA偏最小二乘判别分析,OPLS-DA正交偏最小二乘判别分析);
(6)代谢通路分析;
(7)提供分析报告,包括实验步骤,相关的液相条件及质谱参数,总离子流图,提取离子流图,平均质谱图,统计学分析结果及原始数据等。
华怡创生可提供定制化尿液非靶向代谢组学服务,期待您的关注和联系。