标记转移蛋白质作用分析
标记转移蛋白质作用分析
标记转移方法结合了交联方法，通过标记与目标蛋白质相互作用的蛋白质来研究蛋白质-蛋白质相互作用。该方法可用于发现新的相互作用，确认其他技术提出的相互作用，并研究蛋白质复合体。此外，标签转移法可以检测到弱的或短暂的蛋白质相互作用，而这些相互作用通常无法通过免疫共沉淀或Pull-down分析检测到。
在经典的标签转移工作流程中，首先诱饵蛋白与放射性、荧光或生物素标签的标签转移试剂(LTR)的活性部分发生反应；然后标记的诱饵蛋白在体外与猎物蛋白相互作用形成稳定或短暂的复合体，然后复合体暴露在紫外光下以激活交联剂上的光反应基团部分，后与猎物蛋白共价结合；标签转移是通过裂解交联剂间隔臂释放附着的诱饵蛋白来完成的。蛋白质-蛋白质相互作用可以通过多种方法进行分析，包括Western-blot、蛋白质测序和质谱分析。
在以前的研究中，荧光或放射性标记的芳基衍生物、碳烯或二苯甲酮与激素、肽或核酸相连，用于标记和探索未知的猎物蛋白。因此，标签转移方法已被广泛应用于检查核酸-蛋白相互作用。虽然大多数LTRs对于蛋白质的特异性区域的直接标记有价值，但它们通常对蛋白质相互作用网络的映射没有帮助，因为附着在交联剂上的分子通常只与结合区域直接交联。
随着标签转移方法的不断更新，HIT可以帮助您为实验目标选择合适的交联剂，并为您探索的蛋白质-蛋白质相互作用进行后续分析。
