Pull-Down分析
Pull-down分析是一种体外浓缩靶蛋白或直接分析蛋白-蛋白相互作用的方法。它常被用来验证其他分析预测的蛋白质-蛋白质相互作用。它利用与诱饵蛋白结合的珠子来诱捕目标蛋白，然后进行下游分析，如Western blotting和质谱分析。
Pull-down的原理是亲和纯化，类似于免疫沉淀，不同之处在于这种方法是用诱饵蛋白而不是抗体来诱捕目标蛋白。在Pull-down实验中，诱饵蛋白被标记并固定在与标记特异性亲和配体结合的珠上，从而产生一种“二级亲和支撑”用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白。在孵育时，当蛋白质样品含有假定的“猎物”蛋白质(如细胞裂解液)，诱饵蛋白可以结合目标蛋白，从而从裂解液中诱捕目标蛋白。
除了研究两种蛋白质的相互作用，Pull-down分析也可以用来检测特定蛋白质的活化状态。蛋白质的活化通常伴随着蛋白质构象的改变，诱饵蛋白有选择地结合到特定的构象上。在这种情况下，可以利用Pull-down试验选择性地纯化目标蛋白。例如，GTPase效应物只识别有活性的GTPases，因此，当使用GTPase效应物作为诱饵时，只有有活性的GTPases被捕获并纯化，从而可以测定有活性的GTPase的比例。
诱饵蛋白的标签类型：
Pull-down试验诱饵的标签有很多种，如GST、poly-His、biotin等。用来固定诱饵的亲和配体分别是谷胱甘肽、镍和螯合配合物以及链霉亲和素。
HIT提供了上述的Pull-down分析，以满足项目的特定需求。我们的缓冲和分析系统是优化的，也可以根据您的项目需要进行调整。欢迎您发来询价，讨论您的具体项目需求。
Pull-down分析的特点：
•研究蛋白质和蛋白质复合物之间的直接相互作用
•验证预测的蛋白质-蛋白质相互作用
•分析和量化测试样品中活性/非活性蛋白的特定亚型
HIT Pull-down分析服务包括：
•根据您的具体项目需求进行实验设计：缓冲器、珠子、诱饵标签等。
•参数优化，如绑定时间
•细胞裂解，Pull-down试验：结合，洗涤，洗脱
•Western Blot/质谱分析，视项目需要而定
•数据分析和报告交付
