远-蛋白质印记分析
Far-Western Blot是一种以Western Blot技术为基础，用于检测体外蛋白-蛋白相互作用的分子生物学方法，尤其用于检测不需要目标蛋白本身结构的相互作用。
Far-Western blot技术的整个工作流程与Western blotting类似，除了Western blotting分析中需要抗体来探测靶蛋白。Far-Western blot分析无需抗体，而是需要用纯化和标记的“诱饵”蛋白来检测膜上的目标“猎物”蛋白。在Western blotting和Far-Western blotting中，均需要将蛋白质从SDS凝胶或天然PAGE凝胶中分离出来，然后将蛋白从凝胶中转移到膜上。转移后，膜被一定浓度的牛血清白蛋白堵塞。然后对膜上的蛋白质进行变性和再变性。然后用一种已知的高度纯化的鱼饵蛋白探测膜。随着诱饵蛋白与猎物蛋白的反应，依赖于诱饵蛋白，响应猎物蛋白的带信号因此也能被检测到。
Far-Western blot分析的关键因素：
虽然Far-Western blot是一种方便的方法，并已广泛应用于蛋白质-蛋白质相互作用的研究，但在保持蛋白质的天然构象和相互作用条件时必须谨慎。Far-Western blot的问题包括：首先，对于在变性条件下的SDS凝胶中分离的蛋白质，蛋白质已经发生变性，有可能变性蛋白与诱饵蛋白不能相互作用，导致无法识别相互作用；其次，蛋白在结合实验前发生变性和复性，这也可能导致蛋白的构象发生潜在变化，影响靶蛋白与诱饵蛋白的结合亲和力；第三，如果结合域的暴露受到其他因素的调控，则有可能结合域被埋在内部，无法被诱饵蛋白触及，导致相互作用检测失败；第四，以非天然构象呈现的蛋白质可能以新颖的、人工的方式相互作用，导致假阳性的相互作用。
HIT可以根据您的需要设计实验，并评估可能影响结果的潜在因素。我们承诺提供可靠和高重现性的数据。
Far-Western blot分析的特点：
•研究体外蛋白质相互作用
•绘制蛋白结合区域
•比较蛋白质结合亲和力
•无需抗体
Far-Western blot分析的流程：
•用SDS或native PAGE对蛋白质进行定量和分离
•将蛋白质从凝胶转移到膜上
•转移蛋白变性和重变性以完全暴露结合域
•然后用BSA缓冲液堵塞膜
•将膜与纯化的诱饵蛋白孵育
•检测到诱饵蛋白信号
•图像分析和报告交付
HIT Far-Western blot分析服务包括：
•用放射性诱饵蛋白直接检测猎物蛋白
•针对诱饵蛋白的抗体间接检测
•使用针对融合标记的诱饵蛋白标记的抗体进行间接检测
•使用生物素化诱饵蛋白和酶偶联亲和素或链霉亲和素进行间接检测
