四维正交电泳(4-DE)
四维正交电泳(4-DE)
目前蛋白质复合物的纯化和鉴定方法大多采用亲和纯化结合质谱,如免疫共沉淀和亲和串联纯化。
HIT提供了一种新的方法,即四维正交电泳(4-DE)系统,用于分析细胞质蛋白复合物。4-DE体系由两部分组成:非变性部分[part I (1st/2nd-DE:Native-IEF/Native-PAGE)]和变性部分[part II (3rd/4th-DE:denature IEF/SDS-PAGE)]。第一部分为分离决策过程,第二部分为蛋白复合物亚基综合图谱分析。我们的结果表明,4-DE不仅适用于研究复杂生物样品中的蛋白质复合物、蛋白质-蛋白质相互作用以及结构蛋白质组学,而且可以方便地从稀释的复合物样品中分离和浓缩完整的蛋白质复合物。