序列覆盖率分析
肽段序列覆盖率分析
质谱方法对蛋白质多肽药物分子的肽段覆盖率进行分析的基本原理是将蛋白质分子选用特异性蛋白酶进行切割，酶解后的供试品为复杂的肽段组成的混合物，然后经过液相联用质谱仪进行检测。华怡创生为提高质谱仪对肽段覆盖率的检测，采用Trypsin、Chymotrypsin、GluC等多种酶切以提高覆盖率。
大多数酶解试验中，常用的蛋白质内切酶有胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、Arg-C酶、Lys-C酶和Glu-C酶等。不同蛋白质内切酶作用于不同的氨基酸残基末端，形成不同长度的多肽分子。因此对于肽段覆盖率的检测一般会采用多种酶解联合使用的策略，以提高质谱仪对肽段覆盖率的检测。
蛋白质多肽类药物往往拥有很长的氨基酸序列，在传统蛋白质化学领域，对这些分子进行序列分析需要进行诸如Edman降解法等的化学分析。但是，对于大多数蛋白质药物样品而言，化学测序方法都不能完成对整个氨基酸序列的覆盖。然而蛋白质类药物的理化性质分析中需要氨基酸序列的覆盖率信息，用以完善蛋白质类药物的理化性质信息。华怡创生为客户提供基于shotgun方法的蛋白质多肽类药物的氨基酸序列覆盖率测定服务。
