1DSDS-PAGE与IEF分析
1D SDS-PAGE
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰氨凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE）在蛋白质表达分析等科研工作中经常用到。可用于获取蛋白质样品的电泳图谱，结合其它基于质谱的蛋白质鉴定服务对样品进行分析或纯化，用于复杂生物样品的蛋白质谱分析。
华怡创生（北京）科技有限公司可根据您的需求，提供基于1D SDS-PAGE的蛋白质分离服务：基于我司优化的标准操作流程，使用Bio-Rad Mini-PROTEAN® Tetra凝胶系统进行1D SDS-PAGE蛋白质分离。将蛋白样品(5-20ug)用上样缓冲液稀释到一定浓度并加热（沸水浴5 min），根据样品的分析目的选择适当浓度的凝胶并将样品上样到凝胶孔中，加入电泳缓冲液，首先在80V电压下恒压分离15min，然后在120V电压下恒压分离60 min。分离后卸下胶板，将凝胶用考马斯亮蓝染色或银染染色。
IEF
蛋白质是同时含有带正电荷和负电荷官能团的两性分子，其总电荷通常是由其周围环境的pH值所决定。当外部pH使蛋白质分子的酸性解离和碱性解离相等，即分子所带的正电荷和负电荷相互抵消，此时的pH值被称为该蛋白质的等电点（isoelectric point, pI）。等电聚焦(Isoelectric focusing，IEF)是一种基于蛋白质等电点(pI)的电泳分离技术。
在IEF中，分离是在含有两性电解质的聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶的平板中进行的，当受到电场作用时，两性电解质在凝胶中迁移并产生pH梯度。IEF分析中，需要聚焦的分子分布在pH梯度确定的介质上。电流通过介质并产生“正”阳极和“负”阴极。带负电荷的分子通过介质中的pH梯度向“正”端迁移，而带正电荷的分子则向“负”端迁移。当粒子向电荷相反的极移动时，当它们接近特定的pI时，它被固定在pH梯度中。因此，蛋白聚焦成尖锐的固定带，每个蛋白定位于与pI相对应的pH梯度中的一点。IEF技术具有极高的分辨率，甚至只有一个电荷不同的蛋白质也能被分割成不同的条带。
华怡创生（北京）科技有限公司可根据您的需求，提供基于IEF的蛋白质分离服务。
